IPTG保存条件(lps保存条件)

   2024-02-12 5190
核心提示:本文目录一览: 1、IPTG高温会失效吗 2、iptg的配制浓度,可以高温灭菌吗 3、1M的IPTG怎么配 IPTG高温会失效吗 1、会IPTG中文名为异丙基-β-D-硫代半乳糖苷,通常用水配制成0.1M或20%的储备液。保存于-20度,可以储存很久。但我们平...,茅台尚酱
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本文目录一览:

  • 1、IPTG高温会失效吗
  • 2、iptg的配制浓度,可以高温灭菌吗
  • 3、1M的IPTG怎么配

IPTG高温会失效吗

1、会IPTG中文名为异丙基-β-D-硫代半乳糖苷,通常用水配制成0.1M或20%的储备液。保存于-20度,可以储存很久。但我们平时在4度放置几个星期也可以用的,相对稳定的。

IPTG保存条件(lps保存条件)

2、μl的Amp(100 mg/ml),制作成IPTG、X-Gal、Amp平板培养基。配制好后保存于-20°C,室温可放置一个月。虽然IPTG 比较稳定,但高温灭菌仍然是不适合的。

3、当有乳糖存在时,lac操纵子即可被诱导,真正的诱导剂并非乳糖本身。乳糖进入细胞,经β-半乳糖苷酶催化,转变为半乳糖,后者作为一种诱导剂分子结合阻遏蛋白,使蛋白构象变化,导致阻遏蛋白与O序列解离,发生转录。

iptg的配制浓度,可以高温灭菌吗

1、μl的Amp(100 mg/ml),制作成IPTG、X-Gal、Amp平板培养基。配制好后保存于-20°C,室温可放置一个月。虽然IPTG 比较稳定,但高温灭菌仍然是不适合的。

2、dNTP溶液: 配制后分装-70℃,需测定浓度。1 0.5mol/l EDTA(pH0)溶液: pH0后分装高压灭菌。1 溴化乙锭(10mg/ml): 室温保存,注意其毒性。1 2×HEPES缓冲盐: pH05,-20℃分装。1 IPTG溶液: -20℃分装。1 1mol/L乙酸镁溶液: 1L过滤除菌。

3、要配制T载体克隆试剂,首先准备X-gal溶液。将0.02克X-gal粉末用二甲基甲酰胺(DMF,CAS号68-12-2,无色液体,熔点-61℃,沸点158℃)溶解,配制成20mg/ml的浓度。将溶液储存在玻璃管或聚丙烯管中,用铝箔包裹以防止光照破坏,并保持在-20℃。注意,X-gal溶液无需过滤除菌,可以直接使用。

4、MgSO4溶液配置方法:将12克MgSO4溶解于适量水中,定容至100毫升,高压蒸汽灭菌或过滤除菌后,室温储存。NaOH溶液配置方法:在800毫升水中慢慢加入400克NaOH颗粒,不断搅拌。为预防烧杯破裂,可将烧杯置于冰上。颗粒完全溶解后,定容至1升,存于塑料容器,室温保存,无需灭菌。

1M的IPTG怎么配

1、首先将PMSF和IPTG放置于通风橱中,准备好异戊醇(或无水乙醇),超纯水,移液器,配套枪头,合适的干净无菌容器。将PMSF粉末10mg/ml溶于异丙醇(或无水乙醇)中,因为PMSF溶解在水中较不稳定。可以将PMSF的储存在2-8℃多个月。可以在-20℃环境条件下长期保存。

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2、因为你做的并不是纯化的蛋白电泳,而是菌体的总蛋白,如果不作对照的话,就不能说明哪个条带是你的目的基因的特异表达。如果做目的基因不加诱导剂的对照的话,可以看出目的基因在不诱导下的本底表达水平。也可以看出诱导剂的作用。我们实验室就是那么做的,有时候还会加空菌(宿主菌)的对照。

3、将培养物置于冰上10分钟,然后在4℃下以5,000 x g的速度离心10分钟。移除上清液,将细胞沉淀保存在-20℃下(更低温度的保存也是可接受的)。IPTG的制备:准备1M的IPTG溶液,通过溶解38克IPTG于去离子水中,并调整最终体积至10ml。使用前需进行过滤灭菌。

4、Amp(氨苄青霉素): 配成50mg/ml浓度,储存于-20℃,使用时稀释至所需浓度。IPTG(异丙基-β-D-硫代半乳糖苷): 母液浓度为1M/L,工作液浓度为1mM/L。以上溶液配制方法适用于生物实验中的DNA电泳、SDS-PAGE、蛋白质纯化、PH缓冲液的配制及细胞培养等操作,确保实验的准确性和高效性。

5、你需要准备1M Tris-HCl(pH 4, 6, 0)和5M Tris-Hcl(pH 8)以满足实验需求。2 10×TE buffer(同样有不同pH)也必不可少。

6、TE:1M Tris.HCl(PH0) 1ml(灭菌) 0.5M EDTA(PH0)200 微升(灭菌) r-,e;o9 定溶100ml g/13~UM\ IPTG:8ml蒸馏水中溶解2g IPTG后定溶至10ml,0.22um滤器过滤除菌,分装,-20 oC保存。

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